早(zao)在公元(yuan)前(qian)一世紀(ji)，人們就已(yi)發現(xian)通過球(qiu)形透明物體去觀察微(wei)小物體時，可以使其放大成像。后(hou)來逐漸對球形玻璃表面能使物體(ti)放(fang)大成像的規律有(you)了認識。
1590 年，荷蘭(lan)和(he)意大利的(de)眼鏡制造(zao)(zao)者已經(jing)造(zao)(zao)出類似顯微(wei)鏡的(de)放(fang)大儀器。
1610 年(nian)前后，意大利的(de)伽利略和德國的(de)開普勒在研究望遠鏡的(de)同(tong)時，改(gai)變物鏡和目鏡之間的(de)距離(li)，得(de)出合理的(de)顯微鏡光路結構，當時的(de)光學工匠遂紛紛從事顯微鏡的(de)制造、推廣和改(gai)進。
17 世紀中葉，英國(guo)的胡克和荷(he)蘭的列文胡克，都對顯微(wei)鏡的發展作出(chu)了卓越(yue)的貢獻。
1665 年前后，胡克在(zai)顯微(wei)鏡中加入粗動和(he)(he)微(wei)動調焦機構、照明系(xi)統(tong)和(he)(he)承載標本(ben)片的工作(zuo)臺。這些部件經過不斷改進，成為現代顯(xian)微(wei)鏡的基本組成部分。
1673～1677 年期間(jian)，列(lie)文胡克制成單組(zu)元放大鏡式(shi)的高倍顯微鏡，其中九臺保存(cun)至(zhi)今(jin)。胡克(ke)和列(lie)文胡克(ke)利用自(zi)制的顯微鏡(jing)，在動(dong)、植物機體(ti)微觀結構的研究方(fang)面取得了杰出成就。
19 世紀，高(gao)質量消色差(cha)浸液物鏡的出現(xian)，使(shi)顯(xian)微(wei)鏡觀(guan)察微(wei)細結構(gou)的能力(li)大為提高(gao)。
1827年(nian)阿米奇第一(yi)個采用了浸(jin)液物鏡(jing)。19 世(shi)(shi)紀70 年(nian)代，德國人阿貝奠定了顯(xian)(xian)(xian)微(wei)(wei)鏡(jing)成像的(de)(de)古典理論基礎。這些(xie)都促進了顯(xian)(xian)(xian)微(wei)(wei)鏡(jing)制(zhi)造(zao)和顯(xian)(xian)(xian)微(wei)(wei)觀(guan)察技術的(de)(de)迅速發(fa)展(zhan)，并為(wei)19 世(shi)(shi)紀后半葉包(bao)括科(ke)赫、巴斯德等在內的(de)(de)生物學家(jia)和醫學家(jia)發(fa)現細(xi)菌和微(wei)(wei)生物提供了有(you)力(li)的(de)(de)工具(ju)。在顯(xian)(xian)(xian)微(wei)(wei)鏡(jing)本身(shen)結構發(fa)展(zhan)的(de)(de)同(tong)時(shi)，顯(xian)(xian)(xian)微(wei)(wei)觀(guan)察技術也在不斷創新：
1850 年出(chu)現(xian)了偏光顯微術；
1893 年出(chu)現了干涉顯微術；
1935 年(nian)荷蘭(lan)物理學家澤(ze)爾尼克(ke)創造了相襯顯微術，他為此在1953 年(nian)獲得了諾貝(bei)爾物理學獎。
古(gu)典的(de)光(guang)學顯微鏡只是光(guang)學元(yuan)件(jian)和精(jing)密機械(xie)元(yuan)件(jian)的(de)組合，它(ta)以人(ren)眼作為接(jie)收(shou)器來觀察放大(da)的(de)像(xiang)。后來(lai)在顯微(wei)鏡(jing)中加入了攝(she)影裝置，以(yi)感光膠(jiao)片作(zuo)為(wei)可以(yi)記(ji)錄和(he)存儲的(de)接收(shou)器。現(xian)代又普遍采用光電元件(jian)、電視攝(she)像(xiang)管和(he)電荷(he)耦合器等作(zuo)為(wei)顯微(wei)鏡(jing)的(de)接收(shou)器，配以(yi)微(wei)型電子(zi)計算機后構(gou)成完整的(de)圖像(xiang)信息采集和(he)處理系(xi)統。
目前全世界最主要的(de)顯(xian)微鏡廠家主要有：奧林巴斯(si)、蔡司(si)、徠卡(ka)、尼康。
國內廠家(jia)主要有：江南、麥克(ke)奧迪(di)等。
光學顯微鏡包括光學系統和機械裝置兩大部分，而數碼顯微鏡還包括數碼攝像系統，現分述如下：
（一）機械裝置
1．機架顯微鏡(jing)的主體部分，包括(kuo)底座和(he)彎(wan)臂。
2．目鏡筒(tong)位于機架上(shang)方，靠圓(yuan)形燕尾槽與機架固定，目鏡插在其上(shang)。根據有否攝像功能，可分為雙(shuang)目鏡筒和三(san)目鏡筒；根據瞳距的調節方式不同，可分為鉸鏈式和平移式。
3．物(wu)鏡轉(zhuan)換器它(ta)是一個(ge)旋轉(zhuan)圓盤，上有3～5 個(ge)孔，分別裝有低(di)倍或高倍物(wu)鏡鏡頭。轉(zhuan)動(dong)物(wu)鏡轉換器就可讓不同倍率的物(wu)鏡進入工作光路。
4．載物臺是放置玻片(pian)的(de)平臺，其中(zhong)央具有通(tong)光孔。臺上有一個彈(dan)性的(de)標本夾，用來夾住載玻(bo)片(pian)。右下(xia)方(fang)(fang)有移(yi)(yi)動(dong)(dong)手柄，使(shi)載物臺面可(ke)在XY 雙方(fang)(fang)向進行移(yi)(yi)動(dong)(dong)。
5．調(diao)(diao)焦(jiao)機構利用(yong)調(diao)(diao)焦(jiao)手輪可以驅(qu)動調(diao)(diao)焦(jiao)機構，使載物(wu)臺作粗(cu)調(diao)(diao)和微調(diao)(diao)的(de)升(sheng)降運動，從而使被觀察物(wu)體(ti)對焦清晰成像。
6．聚光(guang)器(qi)調節機構聚光(guang)器(qi)安裝在其上，調節螺旋(xuan)可以(yi)使(shi)聚光(guang)器(qi)升降，用以(yi)調節光(guang)線的強弱(ruo)。
（二）光(guang)學(xue)系(xi)統(tong)
1．目鏡(jing)(jing)它是插(cha)在目鏡(jing)(jing)筒頂(ding)部的(de)鏡(jing)(jing)頭，由(you)一組透鏡(jing)(jing)組成(cheng)，可以使(shi)物(wu)鏡(jing)(jing)成(cheng)倍地(di)分辨、放(fang)大物(wu)像，例(li)如(ru)10X、15X 等。按照(zhao)所能(neng)(neng)看到的(de)視(shi)(shi)場(chang)大小，目鏡(jing)(jing)(jing)可(ke)分為(wei)視(shi)(shi)場(chang)較(jiao)小的(de)普(pu)通目鏡(jing)(jing)(jing)，和(he)視(shi)(shi)場(chang)較(jiao)大的(de)大視(shi)(shi)場(chang)目鏡(jing)(jing)(jing)(或稱(cheng)廣(guang)角目鏡(jing)(jing)(jing))兩(liang)類。較(jiao)高檔顯(xian)微(wei)鏡(jing)(jing)(jing)的(de)目鏡(jing)(jing)(jing)上(shang)還裝(zhuang)有視(shi)(shi)度(du)調節機(ji)構，操作(zuo)者(zhe)可(ke)以(yi)(yi)方(fang)便快捷地對左右眼(yan)分別進行視(shi)(shi)度(du)調整；此(ci)外，在這(zhe)些目鏡(jing)(jing)(jing)上(shang)可(ke)以(yi)(yi)加裝(zhuang)測量分劃板(ban)，測量分劃板(ban)的(de)象總能(neng)(neng)清晰地調焦在標本的(de)焦面(mian)上(shang)；并且，為(wei)了防止(zhi)目鏡(jing)(jing)(jing)被取走以(yi)(yi)及(ji)減(jian)少
運輸中被(bei)損壞的可能性，這些目鏡可以被(bei)鎖定。
2．物鏡(jing)它安(an)裝在(zai)轉(zhuan)換器的(de)孔上，也是由一(yi)組透鏡(jing)組成(cheng)的(de)，能夠把物體清(qing)晰地(di)放大。物鏡上刻有(you)放大(da)倍數，主要有(you)10X、40X、60X、100X 等。高倍物(wu)鏡中多(duo)采用浸液物(wu)鏡，即在物(wu)鏡的下(xia)表面和標(biao)本片的上表面之間填充折射率為1.5 左(zuo)右(you)的液體（如杉(shan)木油），它(ta)能顯(xian)著的提(ti)高顯(xian)微(wei)觀察的分辨率。
3．光(guang)源有(you)鹵素燈、鎢絲燈、汞燈、熒光(guang)燈、金屬鹵化物燈等。
4．聚(ju)光(guang)器包括(kuo)聚(ju)光(guang)鏡(jing)、孔徑光(guang)闌。聚(ju)光(guang)鏡(jing)由透鏡(jing)組成，它可以集中(zhong)透射過來的(de)光(guang)線，使更多的光(guang)(guang)能集中到被觀察的部(bu)位(wei)。孔(kong)徑光(guang)(guang)闌可(ke)控制聚光(guang)(guang)器的通(tong)光(guang)(guang)范(fan)圍，用以(yi)調節光(guang)(guang)的強度。
（三）數碼(ma)攝(she)像系(xi)統(tong)
1．攝像頭
2．圖像采集卡
3．軟件
4．微機(ji)
光學顯微鏡有多種分類方法：按使用目(mu)鏡的數目(mu)可分為雙目和單目顯微鏡；按圖像是否有立體感可分為立體視覺和非立體視覺顯微鏡；按觀察(cha)對像可分為生物和金相顯微鏡等；按光學原理可分為偏光、相襯和微差干涉對比顯微鏡等；按光源類型可分為普通光、熒光、紫外光、紅外光和激光顯微鏡等；按接收器類型可分為目視、數碼（攝像）顯微鏡等。常用的顯微鏡有雙目體視顯微鏡、金相顯微鏡、偏光顯微鏡、熒光顯微鏡等。
1．雙目體(ti)視顯微鏡(jing)
雙目(mu)體視顯微(wei)(wei)鏡又稱"實體顯微(wei)(wei)鏡"或"解剖(pou)鏡"，是一種具有(you)正象立體感(gan)地目(mu)視儀(yi)器。在生(sheng)物、醫學領域廣泛用于切片(pian)操作和顯微(wei)外(wai)科手術；在工業中(zhong)用于微(wei)小零件和集成電路的(de)觀測、裝配(pei)、檢查(cha)等工作。它具有(you)如下特(te)點：
（1）利用雙(shuang)通道光(guang)路，雙(shuang)目鏡筒中的左右兩光(guang)束不是平行(xing)，而是具有一定的夾角--體視(shi)角（一般為12 度--15 度），為左右(you)兩眼(yan)提(ti)供一個具有(you)立體(ti)(ti)感的圖像。它實(shi)質上是兩個單(dan)鏡(jing)筒顯微鏡(jing)并列放置，兩個鏡(jing)筒的光軸構成相當于人們用(yong)雙目觀察一個物體(ti)(ti)時所(suo)形(xing)成的視(shi)角，以此形(xing)成三維空間的立體(ti)(ti)視(shi)覺圖像。
（2）象(xiang)是直立的(de)，便于操作(zuo)和(he)解(jie)剖(pou)，這是由(you)于在目(mu)鏡(jing)下(xia)方的(de)棱鏡(jing)把(ba)象(xiang)倒轉過來(lai)的(de)緣故。
（3）雖然放大(da)率不如常規顯(xian)微鏡，但其(qi)工(gong)作距離很長。
（4）焦深(shen)大，便于觀察(cha)被檢物體的全層(ceng)。
（5）視場直(zhi)徑大(da)。
目前體視鏡的光(guang)學結構是(shi)：由一個(ge)共用的初級物(wu)鏡，對物(wu)體成象后的兩光(guang)束被兩組中間物鏡----變焦鏡分開(kai)，并成一(yi)體(ti)視(shi)角再經(jing)各自的目鏡成象(xiang)(xiang)，它(ta)的倍率變化是由(you)改變中間鏡組(zu)之間的距離而獲得的，因此(ci)又稱為"連續變倍體(ti)視(shi)顯微鏡"（Zoom-stereomicroscope）。隨(sui)著應用的要求，目前體(ti)視(shi)鏡可選配豐(feng)富的選購(gou)附(fu)件，如(ru)熒(ying)光，照相(xiang)，攝(she)象(xiang)(xiang)，冷光源等等。
2．金相顯微鏡
金相顯(xian)微鏡是專門用于觀(guan)察金屬和礦物(wu)等不透明物(wu)體金相組織的顯(xian)微鏡。這些不透明物體無(wu)法(fa)在(zai)(zai)普通的透射光顯微鏡(jing)中(zhong)觀察，故金相和普通顯微鏡(jing)的主要差別在(zai)(zai)于前(qian)者以(yi)反射光，而后(hou)者以(yi)透射光照明。在(zai)(zai)金相顯微鏡(jing)中(zhong)照明光束從物(wu)鏡(jing)方向射到被觀察物(wu)體表面，被物(wu)面反射后(hou)再返(fan)回物(wu)鏡(jing)成像。這種反射照明方式(shi)也廣泛用于集成電路硅(gui)片的檢測工作。
3．偏(pian)光顯微鏡(jing)（Polarizingmicroscope）
偏光顯微(wei)鏡是用于研究所(suo)謂(wei)透明與(yu)不(bu)透明各向(xiang)異性材料的(de)一種(zhong)顯微(wei)鏡。凡具有雙折射的(de)物質，在(zai)偏光顯微鏡下就能(neng)分辨的清楚，當然這些物質也可用染色法來進行(xing)觀察，但(dan)有些則不可能(neng)，而必須(xu)利(li)用偏光顯微鏡。
（1）偏光顯(xian)微鏡(jing)的(de)特點
將普通光(guang)改變為偏振光(guang)進(jin)行鏡(jing)檢的方法，以(yi)鑒別某(mou)一物質是(shi)單(dan)折(zhe)(zhe)射（各向同行）或雙折(zhe)(zhe)射性（各向(xiang)異(yi)性）。雙折(zhe)射性是晶(jing)體的基本特(te)性。因(yin)此(ci)，偏光顯(xian)微鏡(jing)被廣泛地應用(yong)在(zai)礦物、化學(xue)等領(ling)域，在(zai)生物學(xue)和植物學(xue)也(ye)有(you)應用(yong)。
（2）偏光顯(xian)微(wei)鏡的基本原理
偏光顯(xian)微(wei)鏡的原理比較復(fu)雜(za)，在此不作過多(duo)介紹,偏光顯(xian)微(wei)鏡必須具(ju)備以下附件：起偏
鏡，檢偏鏡，補償器(qi)或相位片，專用無應力物鏡，旋轉載物臺。
（3）偏(pian)光鏡檢(jian)術的方式(shi)
a.正相(xiang)鏡檢(jian)（Orthscope）:又稱(cheng)無畸(ji)變(bian)鏡檢(jian)，其(qi)特點是(shi)使用低(di)倍物鏡，不用伯特蘭透鏡（BertrandLens）,被研究對(dui)象可直接用(yong)偏振光研究。同(tong)時為使照明孔徑(jing)變小，推開聚光鏡的上(shang)透鏡。正相鏡檢用(yong)于檢查(cha)物體的雙折射(she)性(xing)。
b.錐光(guang)鏡檢（Conoscope）：又(you)稱干(gan)涉(she)鏡檢，研究在偏振(zhen)光(guang)干(gan)涉(she)時產生的(de)干(gan)涉(she)圖樣，這(zhe)種(zhong)方法用于觀(guan)察物體(ti)的單軸或雙軸性(xing)。在(zai)該方法中，用強會聚偏(pian)振光束照明。
（4）偏光顯微鏡(jing)在裝置上(shang)的(de)要求
a.光源：最好采用(yong)單色光，因為(wei)光的速度，折(zhe)射率，和干涉現象由于波(bo)長的不同而有差異。一(yi)般鏡檢可使用普通(tong)光(guang)。
b.目鏡：要帶(dai)有十(shi)字線的目鏡。
c.聚光鏡：為了取得(de)平(ping)行偏光，應使用(yong)能(neng)推(tui)出(chu)上透鏡的搖出(chu)式(shi)聚光鏡。
d.伯特(te)蘭透鏡(jing)：聚光(guang)鏡(jing)光(guang)路中的輔助部(bu)件(jian)，這(zhe)是把物體所有造成的初級相放大為(wei)次級相的輔助透鏡。它(ta)可保證用目鏡來觀察(cha)在物鏡后(hou)焦平面中形(xing)成的平涉圖樣。
（5）偏光鏡檢(jian)術的要求(qiu)
a.載物臺的(de)中心與光軸(zhou)同軸(zhou)。
b.起偏鏡和檢偏鏡應處于正交位置。
c.制片不(bu)宜過薄。
4．熒光(guang)顯微(wei)鏡
熒光(guang)顯微(wei)鏡是用短波(bo)長的(de)光(guang)線(xian)照射用熒光(guang)素染色過的(de)被檢(jian)物體，使之受激發(fa)后而產生長波長(chang)的熒光，然(ran)后觀察。熒光顯(xian)微鏡廣(guang)泛應用于生物，醫(yi)學等領域。
（1）熒光顯微鏡一(yi)般(ban)分為透射和落射式兩種(zhong)類型(xing)。
a.透射式(shi)：激發光來(lai)自被檢物(wu)體的下方，聚(ju)光鏡(jing)為暗視野聚(ju)光鏡(jing)，使激發光不(bu)進入物(wu)鏡(jing)，而使(shi)熒光進入(ru)物鏡。
b.落(luo)射(she)(she)式：透(tou)射(she)(she)式目前幾乎被(bei)淘汰，新(xin)型的熒光(guang)(guang)顯微(wei)鏡多為落(luo)射(she)(she)式，光(guang)(guang)源來自(zi)被(bei)檢物體的(de)上方，在(zai)光路中(zhong)具有分光鏡，所以(yi)對透明(ming)和不(bu)(bu)透明(ming)的(de)被(bei)檢物(wu)體都適用(yong)。由于(yu)物(wu)鏡起了聚(ju)光鏡的(de)作用(yong)，不(bu)(bu)僅便于(yu)操作，而且從低倍(bei)到高倍(bei)，可以(yi)實現整(zheng)個(ge)視場的(de)均勻照明(ming)。
（2）熒光鏡檢(jian)術的注意事項
a.激發(fa)光長時(shi)間(jian)(jian)的(de)照(zhao)射(she)，會發(fa)生熒光的(de)衰減(jian)和(he)淬滅現象，因此盡可能縮短觀察時(shi)間(jian)(jian)，暫(zan)時不觀察時，應用擋板(ban)遮蓋(gai)激發(fa)光。
b.作油鏡觀察時(shi)，應用"無熒光油"。
c.熒光幾乎都較(jiao)弱，應在較(jiao)暗的(de)室內進行(xing)。
d.電(dian)源最好裝(zhuang)穩壓(ya)器，否則電(dian)壓(ya)不(bu)(bu)穩不(bu)(bu)僅會降(jiang)低汞(gong)燈的壽命，也會影響鏡(jing)檢(jian)的效果。目(mu)前許多新(xin)興生物研究(jiu)領域應用到(dao)熒光顯微鏡，如(ru)基因原位雜交（FISH）等(deng)等(deng)。
5．相(xiang)襯顯微(wei)鏡（Phasecontrastmicroscope）
在(zai)光學顯(xian)微(wei)鏡的(de)發(fa)展過程中，相襯鏡檢術(shu)(shu)的(de)發(fa)明(ming)成功，是近代顯(xian)微(wei)鏡技術(shu)(shu)中的(de)重(zhong)要成就。
我(wo)們知道(dao)，人眼只能(neng)區分光波的波長（顏色）和(he)振幅（亮度），對于無色通明的生物標本(ben)，當光(guang)線通過(guo)時，波長和振幅變(bian)化(hua)不(bu)大(da)(da)(da)，在明場觀(guan)察時很難觀(guan)察到標(biao)本。相襯(chen)顯微鏡(jing)利(li)用被檢物體的(de)(de)光(guang)程之差(cha)進行鏡(jing)檢，也(ye)就(jiu)是有效地利(li)用光(guang)的(de)(de)干涉現象，將人眼不(bu)可分辨的(de)(de)相位差(cha)變(bian)為可分辨的(de)(de)振幅差(cha)，即使是無色透(tou)明的(de)(de)物質也(ye)可成為清晰可見。這大(da)(da)(da)大(da)(da)(da)便利(li)了活體細胞的(de)(de)觀(guan)察，因此相襯(chen)鏡(jing)檢法廣泛應用于倒置顯微鏡(jing)中(zhong)。
6．微分(fen)干涉(she)對比顯微鏡（DifferentialinterferencecontrastDIC）
微分干涉對比鏡檢術(shu)出(chu)現于60 年代(dai)，它不僅(jin)能觀(guan)察(cha)無(wu)色(se)透明的物體，而且(qie)圖象(xiang)呈現出(chu)
浮雕壯(zhuang)的(de)立(li)體感，并具有相(xiang)襯(chen)鏡(jing)檢術所不能達到的(de)某些優點(dian)，觀察(cha)效果更為逼真。
7．倒置顯微(wei)鏡（Invertedmicroscope）
倒置顯微鏡(jing)是為了適應(ying)生物(wu)學、醫學等領域中的組(zu)織培養(yang)、細胞離(li)體培養(yang)、浮游生物(wu)、環境保護、食(shi)品檢驗(yan)等(deng)顯(xian)微觀察。
由(you)于上述樣品特點的限制，被檢物體均(jun)放置(zhi)在(zai)培養皿（或培養瓶）中，這樣就要(yao)求倒置(zhi)顯(xian)(xian)微(wei)(wei)鏡(jing)(jing)的(de)物鏡(jing)(jing)和(he)聚(ju)光(guang)(guang)鏡(jing)(jing)的(de)工作距離很(hen)長(chang)，能直接對培養皿(min)中的(de)被檢物體進行顯(xian)(xian)微(wei)(wei)觀察和(he)研(yan)究。因此，物鏡(jing)(jing)、聚(ju)光(guang)(guang)鏡(jing)(jing)和(he)光(guang)(guang)源的(de)位置都顛倒(dao)過來，故稱為"倒(dao)置顯(xian)(xian)微(wei)(wei)鏡(jing)(jing)"。由于工(gong)作距(ju)離的限制，倒(dao)置(zhi)顯微鏡(jing)(jing)物(wu)鏡(jing)(jing)的最大放大率為(wei)60X。一般研究(jiu)用倒(dao)置(zhi)顯微鏡(jing)(jing)都配(pei)置(zhi)有4X、10X、20X、及(ji)40X 相差物(wu)鏡(jing)(jing)，因為(wei)倒(dao)置(zhi)顯微鏡(jing)(jing)多(duo)用于無(wu)色透明的活體觀察。如果用戶有特殊需要，也可(ke)以選(xuan)配其它附件，用來完成微分(fen)干涉、熒光(guang)及簡易(yi)偏光(guang)等(deng)觀察。目見倒置顯微鏡廣泛應(ying)用于patch-clamp,transgeneICSI 等(deng)領域(yu)。
8．數碼顯微(wei)鏡
數碼顯微(wei)(wei)鏡(jing)(jing)是以攝像頭（即(ji)電視(shi)攝像靶或電荷耦合器）作為接收元件的顯微(wei)(wei)鏡(jing)(jing)。在顯微(wei)鏡(jing)的實(shi)像(xiang)面處(chu)裝入(ru)攝(she)像(xiang)頭(tou)取代人眼作為接(jie)收器，通過這(zhe)種(zhong)光(guang)電器件把光(guang)學圖(tu)像(xiang)轉換成電信號的圖(tu)像(xiang)，然后(hou)對(dui)之進(jin)行尺寸檢測(ce)、顆粒(li)計數等工(gong)作。這(zhe)類顯微鏡(jing)可以與計算機(ji)聯用(yong)，這(zhe)便于實(shi)現檢測(ce)和信息處(chu)理的自動化，多應(ying)用(yong)于需要進(jin)行大量繁瑣檢測(ce)工(gong)作的場合。
（一(yi)）實驗時要把顯微鏡(jing)(jing)放在座前桌面上稍偏(pian)左的位置，鏡(jing)(jing)座應距桌沿6～7cm 左右。
（二）打開光源開關，調節光強(qiang)到(dao)合(he)適大小。
（三）轉動物鏡轉換器，使低倍鏡頭正對(dui)載物臺(tai)上的通光孔。先把鏡頭調節至距載物臺(tai)1～2cm 左(zuo)(zuo)右處，然后用(yong)左(zuo)(zuo)眼注視目鏡(jing)內，接(jie)著調(diao)節聚光器的(de)高度，把孔徑光闌調(diao)至最(zui)大，使光線通過聚光器入射到鏡(jing)筒內，這時視野內呈明亮的(de)狀(zhuang)態。
（四(si)）將所要觀察的(de)(de)玻片放(fang)在載物臺(tai)上(shang)，使玻片中被觀察的(de)(de)部(bu)分位于通光孔的(de)(de)正中央(yang)，然后用標本(ben)夾夾好載(zai)玻片。
（五）先用低倍鏡(jing)觀察(cha)(cha)（物鏡(jing)10X、目鏡(jing)10x）。觀察(cha)(cha)之前，先轉動粗動調(diao)焦手輪(lun)，使載(zai)物(wu)(wu)臺上升，物(wu)(wu)鏡逐漸接近玻(bo)(bo)(bo)(bo)片。需要注意，不(bu)能使物(wu)(wu)鏡觸及玻(bo)(bo)(bo)(bo)片，以(yi)(yi)防鏡頭將玻(bo)(bo)(bo)(bo)片壓碎。然后(hou)，左眼(yan)(yan)注視目鏡內，同時右眼(yan)(yan)不(bu)要閉合（要養成睜開雙眼(yan)(yan)用(yong)顯(xian)微(wei)鏡進行觀察(cha)的習(xi)慣，以(yi)(yi)便在觀察(cha)的同時能用(yong)右眼(yan)(yan)看(kan)著(zhu)繪圖(tu)），并轉動粗動調焦手輪，使載(zai)物(wu)(wu)臺慢(man)慢(man)下降，不(bu)久即可看(kan)到玻(bo)(bo)(bo)(bo)片中(zhong)材料的放(fang)大(da)物(wu)(wu)像。
（六）如果在視野(ye)內看到的物像不(bu)符(fu)合(he)實驗(yan)要求(qiu)（物像偏離視野(ye)），可(ke)慢慢調(diao)節(jie)載(zai)物臺移(yi)動(dong)手(shou)(shou)柄(bing)。調節時應注意玻片(pian)移(yi)動(dong)的(de)方向(xiang)與視野(ye)中看到的(de)物(wu)像移(yi)動(dong)的(de)方向(xiang)正好相反。如果(guo)物(wu)像不甚(shen)清晰(xi)(xi)，可以調節微動(dong)調焦手(shou)(shou)輪(lun)，直至物(wu)像清晰(xi)(xi)為止。
（七）如果進(jin)一步使用高(gao)倍(bei)物鏡觀(guan)察，應在轉換高(gao)倍(bei)物鏡之前(qian)，把物像(xiang)中需要放大觀(guan)察的部分(fen)移(yi)至視野中(zhong)(zhong)央(yang)（將(jiang)低(di)(di)(di)倍物(wu)鏡(jing)(jing)轉換(huan)成高(gao)倍物(wu)鏡(jing)(jing)觀(guan)察(cha)時(shi)，視野中(zhong)(zhong)的物(wu)像范圍縮小了很多）。一般具有正常功(gong)能的顯微鏡(jing)(jing)，低(di)(di)(di)倍物(wu)鏡(jing)(jing)和(he)高(gao)倍物(wu)鏡(jing)(jing)基本齊(qi)焦，在用低(di)(di)(di)倍物(wu)鏡(jing)(jing)觀(guan)察(cha)清(qing)晰(xi)時(shi)，換(huan)高(gao)倍物(wu)鏡(jing)(jing)應可以見到物(wu)像，但物(wu)像不一定很清(qing)晰(xi)，可以轉動微動調(diao)焦手輪進(jin)行調(diao)節。
（八）在轉(zhuan)換高倍物鏡并且看清(qing)物像之后，可以根據(ju)需(xu)要(yao)調節孔徑光闌的(de)大(da)小或聚光器的高低(di)，使光線符合要求（一般將低(di)倍物鏡換成高倍物鏡觀察時，視野要稍(shao)變暗一些，所以需(xu)要調節光線強弱）。
（九）觀察完畢，應先將物鏡鏡頭從通光孔處移開，然后將孔徑光闌調至最大，再將載物臺緩緩落下，并檢查零件有無損傷（特別要注意檢查物鏡是否沾水沾油，如沾了水或油要用鏡頭紙(zhi)擦凈(jing)），檢查處理完畢后即可(ke)裝箱(xiang)。
（一(yi)）必須熟練(lian)掌握并嚴格執行使(shi)用規程。
（二）取送顯(xian)微鏡(jing)時一定要(yao)一手(shou)握住(zhu)彎臂，另一手(shou)托住(zhu)底(di)座。顯(xian)微鏡(jing)不能傾(qing)斜，以免目鏡(jing)(jing)從鏡(jing)(jing)筒上(shang)端滑出(chu)。取送顯微(wei)(wei)鏡(jing)(jing)時要輕拿輕放(fang)。
（三）觀察時，不能隨便移動顯(xian)微(wei)鏡的位(wei)置(zhi)。
（四(si)）凡是顯微鏡(jing)的光學部分，只能用特殊的擦(ca)鏡(jing)頭(tou)紙(zhi)擦(ca)拭，不能亂用他物擦(ca)拭，更不能用手指觸摸透(tou)鏡，以免(mian)汗(han)液玷污透(tou)鏡。
（五(wu)）保(bao)持顯微(wei)鏡的干燥、清(qing)潔，避免灰塵(chen)、水及化學試劑的玷污。
（六）轉(zhuan)換(huan)物鏡(jing)鏡(jing)頭時，不(bu)要搬動(dong)物鏡(jing)鏡(jing)頭，只(zhi)能轉(zhuan)動(dong)轉(zhuan)換(huan)器(qi)。
（七）切勿隨意(yi)轉動(dong)(dong)(dong)調焦(jiao)手輪。使用微動(dong)(dong)(dong)調焦(jiao)旋鈕時，用力要輕，轉動(dong)(dong)(dong)要慢，轉不(bu)動(dong)(dong)(dong)時不(bu)要硬轉。
（八）不(bu)得任(ren)意拆(chai)(chai)卸顯微鏡(jing)上的(de)零(ling)件(jian)，嚴禁(jin)隨意拆(chai)(chai)卸物鏡(jing)鏡(jing)頭(tou)，以免(mian)損傷(shang)轉換器螺口，或螺口(kou)松動后使低高(gao)倍(bei)物鏡轉換時(shi)不齊焦。
（九）使用高(gao)倍物(wu)鏡(jing)時，勿用粗動(dong)調焦手輪(lun)調節焦距，以免移動(dong)距離過大，損傷物(wu)鏡(jing)和玻片。
（十）用(yong)畢送還前(qian)，必須檢查物鏡(jing)鏡(jing)頭上(shang)是否(fou)沾有水或(huo)試劑(ji)，如有則要(yao)擦拭干(gan)凈，并且要把(ba)載物臺(tai)擦拭(shi)干凈，然后將顯(xian)微鏡放(fang)人(ren)箱(xiang)內(nei)，并注意鎖(suo)箱(xiang)。
